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作者:新万博体育安卓下载|2020-05-18|浏览:166

您有一份離心機梯度指南待

當離心機制備的提副業是凹狀梯度時,與凸狀梯度相反,先從混合室里流到離心管的是重端梯度液,制備時,輕液要緩慢的鋪上,因而要求針頭以相應的速度抬起,但在多數情況下,只是簡單的將離心管斜放一定角度,新万博体育安卓下载將針頭烤放于離心管口,使溶液沿管壁緩緩流下,逐步鋪上,加完后,再把離心管垂直放好加樣。此時應注意的是,所選用離心管的材料*好是親水性的,如是憎水性離心管,可用一些鹽,這樣再加入梯度溶液時,可保證均勻的流下。

為了密度梯度和樣品區帶的穩定,加到密度梯度液柱頂部樣品的密度必須小于梯度液頂部的密度,如果不是這樣,樣品將以塌陷的方式通過梯度,直到到達等密度區。離心機廠在這個過程中樣品層將明顯的擴展,纏上的小滴沉降會造成區帶分辨力下降。

以冷凍離心機的梯度介質為例,可以歸結為一下特點,梯度介質應該是惰性的,至少對被分離顆粒沒有毒性。應知道梯度介質的理化特性,能夠利用這些特性中的一種或多種特性(如折射率)測定梯度介質的濃度。梯度介質要能夠把懸浮液中的顆粒定量的分離出來,即要求用它所配置的梯度柱要有確定的密度范圍。在給定的密度范圍內,梯度介質對滲透壓敏感的顆粒應該是等滲的。梯度介質應能調到與被分離顆粒生理狀態一致的PH值和離子強度,并且不管介質濃度如何變化,PH值和離子強度都保持不變,也不會發生水合作用。在給定的密度范圍內,梯度介質的粘度應盡可能低。梯度介質不會干擾分級分離時樣品區帶的監測。

離心機梯度介質應該很方便的從分離的顆粒中除去,并且不損失樣品的活性。能夠消毒,并且分離特性不變,不腐蝕所用的離心管、轉子和各種量器。所用的梯度材料應該是純的物質,價格便宜,貴重材料使用后便于回收再利用。